農(nóng)用微生物菌劑的標(biāo)準(zhǔn)是什么?農(nóng)用微生物菌劑采用的是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB 20287-2006),詳細(xì)內(nèi)容如下:
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了農(nóng)用微生物菌劑(即微生物接種劑)的術(shù)語(yǔ)和定義、產(chǎn)品分類、要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、標(biāo)識(shí)、運(yùn)輸和貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)用微生物菌劑類產(chǎn)品。
2 規(guī)范性引用文件(略)
3 術(shù)語(yǔ)和定義(略)
4 產(chǎn)品分類
產(chǎn)品按劑型可分為液體、粉劑、顆粒型;按內(nèi)含的微生物種類或功能特性可分為根瘤菌菌劑、固氮菌菌劑、解磷類微生物菌劑、硅酸鹽微生物菌劑、光合細(xì)菌菌劑、有機(jī)物料腐熟劑、促生菌劑、菌根菌劑、生物修復(fù)菌劑等。
5 要求
5.1 菌種
生產(chǎn)用的微生物菌種應(yīng)安全、有效。生產(chǎn)者應(yīng)提供菌種的分類鑒定報(bào)告,包括屬及種的學(xué)名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)等完整資料。生產(chǎn)者應(yīng)提供菌種安全性評(píng)價(jià)資料。采用生物工程菌,應(yīng)具有允許大面積釋放的生物安全性有關(guān)批文。
5.2 產(chǎn)品外觀(略)
5.3 產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)
5.3.1 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)見(jiàn)表1,其中有機(jī)物料腐熟劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)按表2執(zhí)行。
表1 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)
項(xiàng) 目 | 劑 型 | |||
液 體 | 粉 劑 | 顆 粒 | ||
有效活菌數(shù)(cfu)a ,億/g(mL) | ≥ | 2.0 | 2.0 | 1.0 |
霉菌雜菌數(shù),個(gè)/g(mL) | ≤ | 3.0×106 | 3.0×106 | 3.0×106 |
雜菌率, % | ≤ | 10.0 | 20.0 | 30.0 |
水分,% | ≤ | - | 35.0 | 20.0 |
細(xì)度,% | ≥ | - | 80 | 80 |
pH值 | 5.0~8.0 | 5.5~8.5 | 5.5~8.5 | |
保質(zhì)期b,月 | ≥ | 3 | 6 | |
a 復(fù)合菌劑,每一種有效菌的數(shù)量不得少于0.01億/g(mL);以單一的膠質(zhì)芽胞桿菌(Bacillus mucilaginosus)制成的粉劑產(chǎn)品中有效活菌數(shù)不少于1.2億/g。 b 此項(xiàng)僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為有必要時(shí)檢測(cè)。 |
表2 有機(jī)物料腐熟劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)
項(xiàng)目 | 劑 型 | |||
液 體 | 粉 劑 | 顆 粒 | ||
有效活菌數(shù)(cfu), 億/g(mL) | ≥ | 1.0 | 0.50 | 0.50 |
纖維素酶活a,U/g(mL) | ≥ | 30.0 | 30.0 | 30.0 |
蛋白酶活b,U/g(mL) | ≥ | 15.0 | 15.0 | 15.0 |
水 分,% | ≤ | - | 35.0 | 20.0 |
細(xì) 度,% | ≥ | - | 70 | 70 |
pH值 | 5.0~8.5 | 5.5~8.5 | 5.5~8.5 | |
保質(zhì)期c,月 | ≥ | 3 | 6 | |
a 以農(nóng)作物秸稈類為腐熟對(duì)象測(cè)定纖維素酶活。 b 以畜禽糞便類為腐熟對(duì)象測(cè)定蛋白酶活。 c 此項(xiàng)僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為有必要時(shí)檢測(cè)。 |
5.3.2 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品中無(wú)害化指標(biāo)見(jiàn)表3。
表3 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的無(wú)害化技術(shù)指標(biāo)
參數(shù) | 標(biāo)準(zhǔn)極限 | |
糞大腸菌群數(shù),個(gè)/g(mL) | ≤ | 100 |
蛔蟲卵死亡率,% | ≥ | 95 |
砷及其化合物(以As計(jì)),mg/kg | ≤ | 75 |
鎘及其化合物(以Cd計(jì)),mg/kg | ≤ | 10 |
鉛及其化合物(以Pb計(jì)),mg/kg | ≤ | 100 |
鉻及其化合物(以Cr計(jì)),mg/kg | ≤ | 150 |
汞及其化合物(以Hg計(jì)),mg/kg | ≤ | 5 |
6 試驗(yàn)方法
6.1 儀器設(shè)備(略)
6.2 試劑(略)
6.3 產(chǎn)品參數(shù)的檢測(cè)
6.3.1 外觀(感官)的測(cè)定
取少量樣品放到白色搪瓷盤(或白色塑料調(diào)色板)中,仔細(xì)觀察樣品的顏色、形狀、質(zhì)地。
6.3.2 有效活菌數(shù)的測(cè)定
采用平板計(jì)數(shù)法,根據(jù)所測(cè)微生物的種類選用適宜的培養(yǎng)基。
若采用最大可能數(shù)(Most Probable Number,MPN)5管法,遵照附錄C的規(guī)定。
6.3.2.1 系列稀釋
稱取樣品10 g(精確到0.01 g),加入帶玻璃珠的100 mL的無(wú)菌水中(液體菌劑取l0.0 mL加入90 mL的無(wú)菌水中),靜置20 min,在旋轉(zhuǎn)式搖床上200 r/min充分振蕩30 min,即成母液菌懸液(基礎(chǔ)液)。
用無(wú)菌移液管分別吸取5.0mL上述母液菌懸液加入45 mL無(wú)菌水中,按1:10進(jìn)行系列稀釋,分別得到1:1×101,1:1×102,1:1×103,1:1×104……稀釋的菌懸液(每個(gè)稀釋度應(yīng)更換無(wú)菌移液管)。
6.3.2.2 加樣及培養(yǎng)
每個(gè)樣品取3個(gè)連續(xù)適宜的稀釋度,用無(wú)菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL,加至預(yù)先制備好的固體培養(yǎng)基平板上,分別用無(wú)菌玻璃刮刀將不同稀釋度的菌懸液均勻地涂于瓊脂表面。
每一稀釋度重復(fù)3次,同時(shí)以無(wú)菌水作空白對(duì)照,于適宜的條件下培養(yǎng)。
6.3.2.3 菌落識(shí)別
根據(jù)所檢測(cè)菌種的技術(shù)資料,每個(gè)稀釋度取不同類型的代表菌落通過(guò)涂片、染色、鏡檢等技術(shù)手段確認(rèn)有效菌。當(dāng)空白對(duì)照培養(yǎng)皿出現(xiàn)菌落數(shù)時(shí),檢測(cè)結(jié)果無(wú)效,應(yīng)重做。
6.3.2.4 菌落計(jì)數(shù)
以出現(xiàn)20~300個(gè)菌落數(shù)的稀釋度的平板為計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)(絲狀真菌為10~150個(gè)菌落數(shù)),分別統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)目和雜菌數(shù)目。當(dāng)只有一個(gè)稀釋度,其平均菌落數(shù)在20~300個(gè)之間時(shí),則以該平均菌落數(shù)計(jì)算。若有兩個(gè)稀釋度,其平均菌落數(shù)均在20~300個(gè)之間時(shí),應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值決定。若其比值小于等于2應(yīng)計(jì)算兩者的平均數(shù);若大于2則以稀釋度小的菌落平均數(shù)計(jì)算。有效活菌數(shù)按式(1)或式(2)計(jì)算:
nm =
kv1/(m0v2) ×10-8 …………………(1)
nv =
kv1/(v0v2) ×10-8 …………………(2)
式中:
nm — 質(zhì)量有效活菌數(shù), 億/g
nv — 體積有效活菌數(shù), 億/mL
— 菌落平均數(shù), 個(gè)
k — 稀釋倍數(shù)
v1 — 基礎(chǔ)液體積, mL
v2 — 菌懸液加入量, mL
v0 — 樣品量, mL
m0 — 樣品量, g
6.3.3 霉菌雜菌數(shù)的測(cè)定
采用馬丁培養(yǎng)基,測(cè)定方法同6.3.2。
6.3.4 雜菌率的測(cè)定
除樣品有效菌外其它的菌均為雜菌。樣品中雜菌率按式(3)計(jì)算:
m = n1/(n1+n)×100 …………………(3)
式中:
m — 樣品雜菌率, %
n1 — 雜菌數(shù), 億/g(mL)
n — 有效活菌數(shù), 億/g(mL)
6.3.5 水分的測(cè)定
將空鋁盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干 0.5 h,冷卻后稱量記錄空鋁盒的質(zhì)量。然后稱取2份平行樣品(顆粒型樣品,應(yīng)先粉碎過(guò)1.0 mm試驗(yàn)篩),每份20 g(精確到0.01 g),分別加入鋁盒中并記錄質(zhì)量。將裝好樣品的鋁盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。取出置于干燥器中冷卻20 min后進(jìn)行稱量。水分含量按式(4)計(jì)算(結(jié)果為兩次測(cè)定的平均值):
w = (m1- m2)/( m1- m0) ×100 …………………(4)
式中:
w — 樣品水分含量, %
m0 — 空鋁盒的質(zhì)量, g
m1 — 樣品和鋁盒的質(zhì)量, g
m2 — 烘干后樣品和鋁盒的質(zhì)量, g
6.3.6 細(xì)度的測(cè)定
6.3.6.1 粉劑樣品
稱取樣品50 g(精確到0.1 g),放入300 mL燒杯中,加200 mL水浸泡10 min~30 min后倒入孔徑0.18 mm的試驗(yàn)篩中,然后用水沖洗,并用刷子輕輕地刷篩面上的樣品,直至篩下流出清水為止。將試驗(yàn)篩連同篩上樣品放入干燥箱中,在105 ℃±2 ℃烘干4 h ~6 h。冷卻后稱量篩上樣品質(zhì)量。樣品細(xì)度按式(5)計(jì)算:
s ={1- m1/[ m0(1-w)]} ×100 …………………(5)
式中:
s — 篩下樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù), %
m0 — 樣品質(zhì)量, g
w — 樣品含水量, %
m1 — 篩上干樣品質(zhì)量, g
6.3.6.2 顆粒樣品
稱取樣品50 g(精確到0.1 g),將兩個(gè)不同孔徑的試驗(yàn)篩(1.0 mm和4.75 mm)摞在一起放在底盤上(大孔徑試驗(yàn)篩放在上面)。樣品倒入大孔徑試驗(yàn)篩內(nèi)篩樣品,然后稱小孔徑試驗(yàn)篩上的樣品質(zhì)量。顆粒細(xì)度按式(6)計(jì)算:
g = m1 /m0 ×100 …………………(6)
式中:
g — 樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù), %
m1 — 小孔徑試驗(yàn)篩上樣品質(zhì)量,g
m0 — 樣 品 質(zhì) 量, g
6.3.7 pH值的測(cè)定
打開(kāi)酸度計(jì)電源預(yù)熱30 min,用標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)。
pH值的測(cè)定,每個(gè)樣品重復(fù)三次,計(jì)算三次的平均值。
6.3.7.1 液體樣品
用量筒取40mL樣品放入50 mL的燒杯中,直接用酸度計(jì)測(cè)定,儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。
6.3.7.2 粉劑樣品
稱取樣品15 g,放入50 mL的燒杯中,按1:2(樣品:無(wú)離子水)的比例將無(wú)離子水加到燒杯中(如果樣品含水量低,可根據(jù)基質(zhì)類型按1:3~1:5的比例加無(wú)離子水),攪拌均勻。然后靜置30 min,測(cè)樣品懸液的pH值,儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。
6.3.7.3 顆粒樣品
樣品先研碎過(guò)1.0 mm試驗(yàn)篩,按照6.3.7.2的方法測(cè)定。
6.3.8 糞大腸菌群數(shù)的測(cè)定
應(yīng)符合GB/T 19524.1《肥料中糞大腸菌群的測(cè)定》的規(guī)定。
6.3.9 蛔蟲卵死亡率的測(cè)定
應(yīng)符合GB/T 19524.2《肥料中蛔蟲卵死亡率的測(cè)定》的規(guī)定。
6.3.10 纖維素酶活、蛋白酶活的測(cè)定
應(yīng)符合附錄D的規(guī)定。
6.3.11 砷、鎘、鉛、鉻、汞的測(cè)定
應(yīng)符合GB 18877—2002中的5.12~5.17的規(guī)定。
6.3.12 保質(zhì)期的檢驗(yàn)
在產(chǎn)品說(shuō)明書標(biāo)明的保質(zhì)期前,按6.3.1~6.3.11方法測(cè)定產(chǎn)品相應(yīng)指標(biāo)。
7 檢驗(yàn)規(guī)則
本標(biāo)準(zhǔn)中產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)的數(shù)字修約應(yīng)符合GB 8170的規(guī)定;產(chǎn)品質(zhì)量合格判定應(yīng)符合GB 1250中修約值比較法的規(guī)定。
7.1 抽樣
按每一發(fā)酵罐菌液(或每批固體發(fā)酵)加工成的產(chǎn)品為一批,進(jìn)行抽樣檢驗(yàn),抽樣過(guò)程嚴(yán)格避免雜菌污染。
7.1.1 抽樣工具
無(wú)菌塑料袋(瓶),金屬勺、抽樣器、量筒、牛皮紙袋、膠水、抽樣封條及抽樣單等。
7.1.2 抽樣方法和數(shù)量
一般在成品庫(kù)中抽樣,采用隨機(jī)法抽取。
抽樣以件為單位,小包裝以每一包裝箱為一件。隨機(jī)抽取3~5件,每件中隨機(jī)抽取一袋(瓶);若每袋(瓶)包裝小于500 g(mL)的產(chǎn)品,應(yīng)多抽幾件。大包裝產(chǎn)品以一袋(桶)為一件,隨機(jī)抽取5~10件,在無(wú)菌條件下,每件取樣500 g(mL),然后將抽取樣品混勻,按四分法分裝3袋(瓶),每袋(瓶)不少于500 g(mL)。
7.2 檢驗(yàn)分類(略)
7.3 判定規(guī)則
7.3.1 具下列任何一條款者,均為合格產(chǎn)品
a. 檢驗(yàn)結(jié)果各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)均符合標(biāo)準(zhǔn)要求的產(chǎn)品;
b. 在產(chǎn)品的外觀、水分、細(xì)度、pH值等檢測(cè)項(xiàng)目中,有1項(xiàng)不符合要求,而其它各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)符合要求的產(chǎn)品。
7.3.2 具下列任何一條款者,均為不合格產(chǎn)品
a. 有效活菌數(shù)不符合技術(shù)指標(biāo);
b. 霉菌雜菌數(shù)不符合技術(shù)指標(biāo);
c. 雜菌率不符合技術(shù)指標(biāo);
d. 糞大腸菌群不符合技術(shù)指標(biāo);
e. 蛔蟲卵死亡率不符合技術(shù)指標(biāo);
f. 砷、鎘、鉛、鉻、汞中任一含量不符合技術(shù)指標(biāo);
g. 有機(jī)物料腐熟劑產(chǎn)品中所測(cè)酶活不符合技術(shù)指標(biāo);
h. 在外觀、水分、細(xì)度、pH值等檢測(cè)項(xiàng)目中,有2項(xiàng)(含)以上不符合要求。
8 包裝、標(biāo)識(shí)、運(yùn)輸和貯存
參見(jiàn)NY 885-2004《農(nóng)用微生物產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求》
以上就是立杉阿飛為大家分享的農(nóng)用微生物菌劑的標(biāo)準(zhǔn),大家可以參考這個(gè)去選購(gòu)正規(guī)產(chǎn)品。